PCR: a máquina de copiar DNA
Esquenta, separa, copia, repete: de uma molécula a bilhões em poucas horas.
Em 60 segundos
A PCR copia um trecho de DNA em ciclos. Aquecimento (~95 °C) desfaz as ligações de hidrogênio e separa as fitas; resfriamento deixa os primers se encaixarem; a DNA-polimerase estende cada fita. Cada ciclo dobra o número de cópias: após ciclos. A polimerase só copia DNA, então para vírus de RNA (ou para ver genes expressos) vem antes a transcriptase reversa, que faz cDNA a partir do RNA (RT-PCR). Depois, a eletroforese separa os fragmentos no gel: os menores correm mais longe.
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Cada ciclo dobra as cópias: 30 ciclos ≈ 1 bilhão de cópias
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A–T tem 2 ligações de H; G–C tem 3: mais A–T, desnatura antes
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PCR não copia RNA: precisa de transcriptase reversa (cDNA) antes
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RNA mensageiro só existe se o gene está ativo: RT-PCR vê genes expressos
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No gel, fragmento menor anda mais e fica mais longe do poço
Veja funcionando
🎛️ Aumente a porcentagem de G–C e veja a barra crescer: é esse segmento que resiste mais ao aquecimento da PCR e desnatura por último.
🧪 Simulação
Quanto calor para abrir a dupla hélice?
Mude o tamanho do segmento e a porcentagem de pares G–C. Veja quantas ligações de hidrogênio seguram as fitas juntas.
- Pares G–C
- 8
- Pares A–T
- 12
- Ligações de hidrogênio
- 48
- Se fosse só A–T
- 40
- Se fosse só G–C
- 60
Com 8 pares G–C e 12 pares A–T, o segmento tem 48 ligações de hidrogênio. Cada G–C trocado por A–T tira uma ligação e baixa a temperatura de desnaturação.