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PCR: a máquina de copiar DNA

Esquenta, separa, copia, repete: de uma molécula a bilhões em poucas horas.

caiu 4× no ENEM · 2024 · 2022 · 2021aula de 2 minutos
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Em 60 segundos

A PCR copia um trecho de DNA em ciclos. Aquecimento (~95 °C) desfaz as ligações de hidrogênio e separa as fitas; resfriamento deixa os primers se encaixarem; a DNA-polimerase estende cada fita. Cada ciclo dobra o número de cópias: 2n2^n após nn ciclos. A polimerase só copia DNA, então para vírus de RNA (ou para ver genes expressos) vem antes a transcriptase reversa, que faz cDNA a partir do RNA (RT-PCR). Depois, a eletroforese separa os fragmentos no gel: os menores correm mais longe.

nH=2 nAT+3 nGCn_H = 2\,n_{AT} + 3\,n_{GC}

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    Cada ciclo dobra as cópias: 30 ciclos ≈ 1 bilhão de cópias

  • ✓

    A–T tem 2 ligações de H; G–C tem 3: mais A–T, desnatura antes

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    PCR não copia RNA: precisa de transcriptase reversa (cDNA) antes

  • ✓

    RNA mensageiro só existe se o gene está ativo: RT-PCR vê genes expressos

  • ✓

    No gel, fragmento menor anda mais e fica mais longe do poço

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Veja funcionando

só se o molde é RNAnovo cicloanálise
RNA (vírus ou gene ativo)
Transcriptase reversa → cDNA
DNA molde (dupla fita)
95 °C: fitas se separam
~55 °C: primers se encaixam
72 °C: polimerase estende
Cópias dobram (2ⁿ)
Eletroforese: menores vão mais longe
O ciclo da PCR (desnaturar, anelar, estender) se repete dezenas de vezes. Se o material de partida é RNA, a transcriptase reversa entra antes; a eletroforese lê o resultado.

🎛️ Aumente a porcentagem de G–C e veja a barra crescer: é esse segmento que resiste mais ao aquecimento da PCR e desnatura por último.

🧪 Simulação

Quanto calor para abrir a dupla hélice?

Mude o tamanho do segmento e a porcentagem de pares G–C. Veja quantas ligações de hidrogênio seguram as fitas juntas.

Pares G–C
8
Pares A–T
12
Ligações de hidrogênio
48
Se fosse só A–T
40
Se fosse só G–C
60
0ligações10ligações20ligações30ligações40ligações50ligações60ligações404860
Só A–T
Seu segmento
Só G–C
Menos ligações de hidrogênio = menos calor para separar as fitas.

Com 8 pares G–C e 12 pares A–T, o segmento tem 48 ligações de hidrogênio. Cada G–C trocado por A–T tira uma ligação e baixa a temperatura de desnaturação.